witta.monika.strobl@
vorm. manfred strobl
Praktikumseinfuehrung
[23. 10. 2008]
[pdf/einfuehrungsvl_haemochromatose_strobl2008.pdf]

* Hereditaere Haemochromatose
* Methoden zum Mutationsnachweis
* gen. DB
* Einf. i. d. Praktikum

Krankengeschichte
61j m 
Herzrasen, Gelenksschm., chron. Muedigkeit, Impotenz
Namnese: Typ 2 DM, Hypertonie, St. p. My
Eisenumsatz: Verlust ueber Zellen (Ery, Darmzellen)
Ferritin erhoeht  (846 mg/l, normal < 440)
Transferrinsaettigung erh. (52 %, normal < 45 %)
Transferrin normal
Hepatitis-Serologie

* Ferritin (SPeicherung) <-> Haemosiderin (Ueberladen)
* freies Eisen: toxisch (oxidierend!)

* oft Hepatitis + Haemochromatose

oxid. Schaedigung

hepcidin reguliert freisetzung:
* Normal: Eisenaufnahme in Darm beschraenkt
* : Eisenaufnahme in Darm beschraenkt

* Eisenablagerung in Leber (Fibrose - Zirrhose - bisw. Carcinom)
* Pankreas: DM
* Haut: Hyperpigm.
* Herz: Kardiomyopathien
* Gonaden: Hypogonadismus
* Gelenke: Arthalgie, Arthritiden

"Klassische Trias" (selten) Leberzirrhose, DM, Hautpigmentierung

fruehzeitige Diagnose Wichgig (5 - 8 j)
Phlebotomie

Familienanamnese! (autosom. rez.)
HFE C282Y steigert intest. Fe-Transportkap., keine Expr. v. HFE-Protein an Zelloberfl.
HFE H63D 

Umweltfaktoren:
* Ernaehrung
* Eisenverlust
* Infektionen
genet.:
Ethnizitaet

Allel-spezifische PCR
Allel-spez. Hybridisierung

neue Mutationen: schwieriger Nachzuweisen
* Sequenzieren
* Screening (DGGE)

Gen-DB OMIM (online mendelian inheritance in humans)
4 tische, 4 gruppen, je 11 studentInnen
je 5 Proben (virtuelle familie)
Risikoberechnung

Teststreifen
Konjugatloesung: Streptavidin (Biotin-AK), daran alk. Phosphatase

10 ul DNAT
10 ul PCR-Produkt
5 min RT
1 ml Hybridiserpuffer
15 min schuetteln

Waschen!
1 ml wash sol A 45 o C
10 s schuetteln
1 ml wash sol A 45 o C
10 min 45 o C

Farbentwicklung

Verlaufskontrolle + fruehzeitige Therapie!